<dd id="1nhaa"></dd>
<span id="1nhaa"></span>
    1. <th id="1nhaa"></th>

      1. <tbody id="1nhaa"><p id="1nhaa"></p></tbody>

        歡迎訪問濟南昌耀工程技術有限公司網站!
        全國咨詢熱線:0531-69952938

        聯系我們

        濟南昌耀工程技術有限公司

        地址:山東省濟南市歷城區唐冶中路4567號魯商鳳凰廣場一期一號樓1806

        聯系人: 王經理 13615312698

        電話:0531-69952938 

        傳真:0531-69952938

        郵編:250100

        郵箱:jnchangyao@126.com

        網址:http://www.zgskt.com

        市場研究

        所在位置:首頁  > 行業考察市場研究

        技術丨生化藥物生產過程中控制熱原的方法

        更新時間:2020-10-30 點擊數:140

        熱原是微生物的代謝產物,是微生物的一種內毒素,其主要成分是脂多糖,分子量一般為106 左右。

        去除熱原的主要方法有:
        1 高溫法。多在250 ℃加熱30 分鐘以上。
        2 酸堿法。用酸或堿進行處理,破壞熱原。
        3 吸附法。常用011 %~015 %的活性炭吸附處理。
        4 層析法。利用離子交換樹脂或分子篩凝膠層析處理。
        5 超濾法。使用超濾裝置濾除熱原物質。
        為了保證熱原符合規定,往往要經過多次實驗才能選擇合適的方法,設計出適宜的工藝路線。在實際產品試制過程中,由于生化藥物及基因工程藥物多為核酸(核苷酸) 類和蛋白質(肽、氨基酸) 類物質,是微生物生長的優良培養基,控制熱原成為一個生產難點。

        控制熱原可以從以下多個方面綜合考慮:


        1  在生產全過程中注意控制熱原的整體水平
        避免在過程中受到微生物污染可避免引入過多的熱原物質。所有的去除熱原的方法都是基于熱原物質在一定水平下,如果熱原污染嚴重,處理起來就相當困難。
        藥品生產的GMP 管理,有效地加強了在生產全過程中對熱原的控制。生產環境潔凈度的控制、物料存放時溫度的控制等,現在生產過程中已能嚴格執行,而對于時間的控制則往往忽視了。在潔凈百級的環境下,環境溫度一般要求在18~26 ℃,沉降菌允許3 個P皿(30 分鐘) 。在此溫度下,蛋白質、核酸類物質有利于微生物的繁殖,也就是說本已是無菌的原料或上一工序已無菌處理的物料,可能出現微生物的生長。因此根據長期的生產經驗,要求物料(液) 在處理完畢后進行除菌過濾,而且從物料打開包裝進行處理、配制到進行除菌過濾,時間宜控制在3 小時內,如處理后仍需冷藏的物料,則處理過程最好控制在2 小時內。

        2  用具處理
        一般教科書中所提供的方法對于已洗干凈的物品均是適用的。而對于已污染微生物或久置未用的用具則需給予特別注意。即在清洗過程中,先使用一定的化學方法進行除熱原處理。如用洗液浸泡15 分鐘以上或1 %氫氧化鈉溶液煮沸15 分鐘(建議不使用碳酸鈉) ,處理完畢后用無熱原水進行清洗。

        3 選擇去除原料、中間品中熱原的方法
        對于可能含有熱原的原料或中間品,去除熱原的方法受到多方面的限制。過酸、過堿、過熱都會導致失活、降解、變性;吸附、超濾則導致含量損失、活性下降。常用的方法主要有凝膠過濾法、超濾法、吸附法。

        3.1  凝膠過濾法
        對于處理量少的樣品(如幾十毫升) ,在實驗室條件下,該法較為適用??筛鶕肿恿亢突瘜W性質選擇凝膠(如Sephadex G75) ,凝膠在裝柱前煮沸滅菌或用稀酸、稀堿洗滌,配制洗脫液的鹽可用高溫法除去熱原,配液用無熱原水(溶劑) ,洗脫液容器的通氣口用無菌脫脂棉封口,當用鱟試驗法檢查層析柱平衡液的流出液內毒素反應呈陰性時,方可進行凝膠過濾,過程中溫度宜控制在10 ℃以下,過濾時間控制在3 小時內,并根據過濾時間來確定柱體積與上樣量。曾測試層析時間為4 小時的蛋白質類物質除熱原,熱原符合規定。


        3.2

         超濾法
        目前生產上已廣泛使用超濾法去除熱原,超濾膜截留孔徑多選用7000~30000 分子量之間,效果較為令人滿意。超濾裝置與超濾膜的完整性是該法的關鍵。超濾前對樣品進行預過濾以及超濾后即時進行清洗,可延長超濾膜的使用壽命。

        對于組份復雜的蛋白質、肽類物質,超濾后,將發生一些變化。對于液態制成品,在貯存期內,可能會緩慢出現微量沉淀、白點、白塊;對于固態制成品,則可能在溶解時存在微量不溶或白點、白塊,從而導致澄明度不合格,這需在工藝中另行克服解決??赡艿脑蚴?超濾前的物質的穩態系統,在超濾過程中部分物質被除去或是除去的比例不同,致使平衡破壞,造成另一部分物質析出而達到新的平衡。

        超濾時還需注意的是pH。濾出液的pH 差值可能變化012 甚至015。另外,待超濾液的pH 不僅對超濾速度產生影響,還直接影響到產品收率、活性。


        3.3

         吸附法
        吸附劑以活性碳最為常用,且成本低廉?;钚蕴嘉教幚頍嵩瓡r的關鍵在于控制pH 與溫度?;钚蕴嫉挠昧繛?11 %~015 % ,一般不必超過014 % ,用量較大時可分次加入。在使用前,將活性碳在180 ℃烘烤2 小時,一方面使活性碳本身去除熱原,另一方面也使得活性碳活化,提高吸附力,使一定工藝條件下吸附力穩定。

        活性碳吸附處理時,料液的pH 應控制在酸性條件下,此時去除熱原的效果比較理想??紤]到對產品性質的影響,一般選擇pH510~615。如料液終
        點pH > 615 ,在活性碳吸附處理前,先將pH 調到pH615 以下;吸附處理后,去除活性碳,然后再回調pH 至終點pH。如在去除活性碳前就回調pH 至終點pH ,則可能使已吸附的熱原物質發生解吸附,從而使熱原不合格。

        活性碳吸附處理時的料液溫度對吸附效果影響也十分重要。如pH610、40 ℃吸附處理20 分鐘熱原不合格的核酸類料液,于pH610、80 ℃吸附處理20分鐘,熱原可符合規定。如果料液性質允許,吸附處理的溫度可盡量提高,相應的可縮短處理時間;如不宜高溫處理,則可降低吸附處理時的pH ,并適當延長吸附時間。通過pH、溫度與吸附時間、活性碳用量的相互配合,在除去的同時,可使含量損失控制在10 %以內。


        濟南昌耀工程技術有限公司

        聯系我們

        濟南昌耀工程技術有限公司

        地址:山東省濟南市歷城區唐冶中路4567號魯商鳳凰廣場一期一號樓1806

        聯系人: 王經理 13615312698

        電話:0531-69952938 

        傳真:0531-69952938

        郵編:250100

        郵箱:jnchangyao@126.com

        網址:http://www.zgskt.com


        掃描二維碼,關注我們

        0531-69952938

        全國客戶服務熱線

        備案號:魯ICP備14031025號-1

        濟南昌耀工程技術有限公司

        亚洲乱码一区二三四区ava_真人作爱试看50分钟3分钟_双飞破女学生处_国产大波爆乳在线观看
        <dd id="1nhaa"></dd>
        <span id="1nhaa"></span>
        1. <th id="1nhaa"></th>

          1. <tbody id="1nhaa"><p id="1nhaa"></p></tbody>